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rRNA去除的必要性

更新時(shí)間:2025-10-22      點(diǎn)擊次數(shù):35
   一、rRNA去除的必要性
  在RNA測(cè)序(RNA-Seq)中,通常需要先去除rRNA。這是因?yàn)榭俁NA中80%以上都是rRNA,而rRNA提供的轉(zhuǎn)錄本信息非常少,且測(cè)序時(shí)會(huì)產(chǎn)生大量無(wú)用的rRNA序列數(shù)據(jù),浪費(fèi)寶貴的測(cè)序資源。因此去除rRNA可以提高測(cè)序效率和數(shù)據(jù)質(zhì)量。
  二、rRNA去除探針的原理
  1、特異性DNA探針雜交與RNase H消化
  - 使用特異性的DNA探針與rRNA雜交,形成DNA-RNA雜交鏈。RNase H能夠特異性地消化DNA-RNA雜交鏈中的RNA單鏈,而未與探針雜交的mRNA、lncRNA等不受影響,從而富集目標(biāo)RNA。
  2、探針雜交捕獲與磁珠吸附
  - 通過(guò)DNA探針或RNA探針雜交捕獲rRNA,然后利用鏈霉親和素磁珠吸附去除rRNA。這種方法稱(chēng)為Ribo-Zero-seq。

rRNA去除探針

  三、rRNA去除探針的應(yīng)用

  1、物種特異性
  - rRNA去除探針需要根據(jù)研究物種的rRNA序列設(shè)計(jì)特異性的雜交探針。
  2、不同RNA類(lèi)型
  - 除了去除細(xì)胞質(zhì)中的rRNA,一些試劑盒還可以去除線粒體中的rRNA。
  3、樣本類(lèi)型
  - rRNA去除探針適用于多種樣本類(lèi)型,包括新鮮樣本、降解樣本、FFPE(甲醛固定石蠟包埋)樣本等。
  四、rRNA去除探針的優(yōu)勢(shì)
  1、高效去除
  - rRNA去除探針可以高效去除rRNA,提高目標(biāo)RNA的富集效率。
  2、特異性高
  - 探針設(shè)計(jì)具有高度特異性,能夠準(zhǔn)確識(shí)別并去除rRNA,而不影響其他目標(biāo)RNA。
  3、適用范圍廣
  - 適用于多種物種和樣本類(lèi)型,能夠滿足不同研究需求。
  通過(guò)使用rRNA去除探針,可以顯著提高RNA測(cè)序的效率和數(shù)據(jù)質(zhì)量,為轉(zhuǎn)錄組研究提供更準(zhǔn)確的信息。
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